技術原理
CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic
Repeats）是(shi)最新出(chu)現的一(yi)(yi)種由sgRNA指導Cas核酸酶對靶向基(ji)因(yin)進(jin)(jin)行特(te)定(ding)DNA修飾的技術(shu)(shu)。在這一(yi)(yi)系(xi)統(tong)中，sgRNA引導序(xu)列靶定(ding)位(wei)點剪切雙鏈DNA達(da)到對基(ji)因(yin)組DNA 進(jin)(jin)行修飾的目(mu)的。CRISPR/Cas9系(xi)統(tong)能夠對小鼠基(ji)因(yin)組特(te)定(ding)基(ji)因(yin)位(wei)點進(jin)(jin)行精確編(bian)輯，目(mu)前瑞思(si)元已經成功將此技術(shu)(shu)應(ying)用于小鼠基(ji)因(yin)敲(qiao)除(chu)/敲(qiao)入模型(xing)制(zhi)備，以及條(tiao)件性(xing)敲(qiao)除(chu)（Loxp系(xi)統(tong)）模型(xing)制(zhi)備。
目前(qian)瑞思(si)元(yuan)采取優化過的野生型Cas9和雙切口Cas9n（Optimized Cas9 System,OCAS and OCASn）。采用優化過的雙切口Cas9n(OCASn)可以將脫(tuo)靶(ba)效應降(jiang)到最低。
條件性(xing)基因敲(qiao)除小鼠
應用sgRNA-Cas9和donor的方(fang)法(fa)將loxP敲入到目的基(ji)因(yin)兩(liang)側，依賴(lai)于(yu)Cre酶進行條件敲除。
運用
研究完全性敲除后(hou)致死性目的基因的生理或(huo)病理功能(neng)；
研究目的(de)基因在(zai)特定(ding)組(zu)織或細胞中的(de)功能(neng)；
研究目的基因在特定(ding)時期(qi)或特定(ding)階段(duan)發揮的作用(yong)；
技術優勢
研發周期(qi)短（4-6個(ge)月(yue)），同源重(zhong)組效率高；
打破對小(xiao)鼠遺傳品系的限制(zhi)，可以實現不同(tong)遺傳背景(jing)或在已有基因修飾小(xiao)鼠模型基礎上進(jin)行基因編輯；
制備流程
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